Serological and molecular techniques applied for identification of Plasmodium spp. in blood samples from nonhuman primates / Técnicas sorológicas e moleculares aplicadas na identificação de Plasmodium spp. em amostras de primatas não humanos

Abstract The aim of this study was to identify Plasmodium spp. in blood samples from nonhuman primates (NHPs) in the state of Maranhão, using classical and alternative techniques for examination of human malaria. A total of 161 blood samples from NHPs were analyzed: 141 from captive animals at a Wildlife Screening Center (CETAS) and 20 from free-living animals in a private reserve. The techniques used were microscopy, rapid diagnostic test (RDT), Indirect fluorescent antibody test (IFAT) and molecular techniques (semi-nested PCR, quantitative real-time PCR and LAMP). Two serological methods (dot-ELISA and indirect ELISA) were also standardized with rhoptry protein-soluble antigen of P. falciparum and P. berghei. Trophozoite forms of Plasmodium sp. were identified on slides from five different animals. No samples were positive through RDT and LAMP. Four samples were seropositive for P. malariae through IFAT. The samples showed low reactivity to ELISA. Plasmodium sp. was detected in 34.16% (55/161) of the samples using qPCR based on the 18S rRNA gene. After sequencing, two samples showed 100% identityl to P. malariae, one showed 97% identity to Plasmodium sp. ZOOBH and one showed 99% identity to P. falciparum . PCR was shown to be the most sensitive technique for diagnosing Plasmodium in NHP samples.

Resumo Neste estudo objetivamos identificar Plasmodium spp. em amostras sangue de primatas não humanos (PNH) do estado do Maranhão, utilizando técnicas clássicas e alternativas para o exame da malária humana. Foram analisadas 161 amostras de sangue de PNH, sendo 141 de CETAS (cativeiro) e 20 de reserva particular (vida livre), utilizando microscopia, teste de diagnóstico rápido (RDT), imunofluorescência indireta (IFI) e técnicas moleculares (semi-nested PCR, PCR em tempo real quantitativo e LAMP). Dois métodos sorológicos (dot-ELISA e ELISA indireto) também foram padronizados com antígenos solúveis de roptrias de P. falciparum e P. berghei. Formas trofozoíticas de Plasmodium sp. foram identificadas em lâminas de cinco animais diferentes. Nenhuma amostra foi positiva em TDR e LAMP. Quatro amostras foram soropositivas para P. malariae na IFI. Os soros de PNH mostraram baixa reatividade pelo ELISA indireto. Plasmodium sp. foi detectado em 34,16% (55/161) das amostras utilizando a qPCR baseada no gene 18S rRNA. No sequenciamento, duas amostras mostraram identidade com P. malariae (100%), uma com Plasmodium sp. ZOOBH (97%) e uma com P. falciparum (99%). A PCR mostrou ser a técnica mais sensível para diagnósticos de Plasmodium em amostras de PNH.

Negative serosurvey of Toxoplasma gondii antibodies in Golden-headed Lion Tamarin (Leontopithecus chrysomelas) from Niterói/RJ, Brazil / Pesquisa sorológica de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em Mico-leão-da-cara-dourada (Leontopithecus chrysomelas) de Niterói/RJ, Brasil

Abstract New World Nonhuman Primates are highly susceptible to clinical toxoplasmosis. Serum samples from 126 recently captured Leontopithecus chrysomelas, from an exotic and invasive population, were tested for Toxoplasma gondii antibodies by the modified agglutination test (MAT, cut-off 1:25); all were seronegative. The MAT is highly specific and is not species-specific. This is the first report of T. gondii survey in this tamarin in the wild. This result is consistent with prior reports that showed the high susceptibility of the species to infection by T. gondii usually with high mortality rates.

Resumo Primatas não humanos são extremamente susceptíveis a toxoplasmose. No presente estudo, 126 Leontopithecus chrysomelas foram capturados de uma população de vida livre, exótica e invasora, e amostras de soros foram testadas para a presença de anticorpos anti- Toxoplasma gondii pelo Teste de Aglutinação Modificado (MAT, ponto de corte 1:25). Todos os animais testados foram negativos. O MAT é um teste altamente específico e não é espécie-específico. Esse é o primeiro estudo de pesquisa por anticorpos anti- T. gondii nessa espécie em vida livre. O resultado corrobora com o conhecimento prévio sobre a susceptibilidade dessa espécie a infecção pelo parasite T. gondii.

Ulcerative and granulomatous enteritis associated with Molineus torulosus parasitism in neotropical primates / Enterite ulcerativa e granulomatosa com parasitismo de Molineus torulosus em primatas neotropicais

This paper reports eleven cases of ulcerative and granulomatous enteritis associated with Molineus torulosus parasitism in different species of neotropical primates of the Sapajus genus. All of the affected monkeys had been apprehended by the environmental police and were being treated in a rehabilitation center for wild animals. The clinical history was weight loss and debility. During the necropsy, several nodules were found on the duodenum and proximal jejunum wall, with ulcers on the adjacent intestinal mucosa, including the nodules in the pancreas of four monkeys. Histologically, eosinophilic granulomas were observed in the small intestine, associated with fibrosis, eggs and adult models of Trichostrongylidae, etiology consistent with Molineus torulosus. This study describes the first cases of parasitism in Sapajus flavius, a species previously considered extinct, but recently rediscovered, and presents the occurrence of M. torulosus in two other species, Sapajus libidinosus and Sapajus apella.(AU)

São relatados 11 casos de enterite ulcerativa e granulomatosa associada ao parasitismo por Molineus torulosus em diferentes espécies de primatas neotropicais do gênero Sapajus. Todos os macacos afetados haviam sido apreendidos pela polícia ambiental e estavam sendo tratados em um centro de reabilitação de animais silvestres. O histórico clínico era de emagrecimento e debilidade. Durante a necropsia, foram constatados diversos nódulos na parede do duodeno e jejuno proximal, com úlceras na mucosa intestinal adjacente, além de nódulos no pâncreas de quatro macacos. Histologicamente, observou-se no intestino delgado, granulomas eosinofílicos associados à fibrose, ovos e exemplares adultos de tricostrongilídeos, etiologia consistente com Molineus torulosus. O presente trabalho descreve os primeiros casos de parasitismo em Sapajus flavius, uma espécie antes considerada extinta e recentemente redescoberta, e relata a ocorrência de M. torulosus em outras duas espécies, Sapajus libidinosus e Sapajus apella.(AU)

Estudo genético dos pigmentos visuais em primatas do Novo Mundo / Genetic study of visual pigments in the New World monkeys

A visão de cores em vertebrados necessita de pelo menos duas classes de cones, (fotorreceptores presentes na retina) e a existência de um substrato neural para que os fótons de luz sejam comparados, processados e posteriormente resultar na sensação da cor. Primatas do Velho Mundo, incluindo humanos, apresentam visão de cor tricromata, enquanto que primatas do Novo Mundo apresentam um polimorfismo nos genes dos pigmentos visuais e, entre os primatas, são os únicos que podem apresentar indivíduos com visão dicromata ou tricromata. O polimorfismo encontrado em primatas do Novo Mundo ocorre devido à variabilidade dos genes que expressam as opsinas responsáveis por absorver comprimentos de onda médios ou longos. Os estudos genéticos das opsinas são essenciais para compreensão do processamento e da sensação de cores nesses animais, e podem ajudar a entender a evolução da visão de cores nos Primatas. O objetivo deste trabalho é caracterizar a diversidade dos pigmentos visuais (LWS/MWS e SWS1) das espécies de primatas do Novo Mundo através de análises genéticas e descrever a sequência de aminoácidos observados para estimar o pico de sensibilidade espectral das opsinas. Foram coletadas amostras de sangue, fezes e/ou pelo de seis gêneros de primatas provenientes de diferentes regiões do Brasil (Pará, Rio de Janeiro, Rio Grande do Norte e São Paulo) e pertencentes às espécies Cebus apella, Callithrix jacchus, Alouatta clamitans, Alouatta caraya, Lagothrix lagothricha, Ateles belzebuth e Brachyteles arachnoides e posteriormente foram analisados os genes que expressam as opsinas nesses indivíduos. As sequências de aminoácidos encontradas nas posições importantes do gene SWS1 (52, 86, 93, 114 e 118) foram diferentes para algumas espécies. No gene SWS1 as espécies C. apella, L. lagotricha, A. belzebuth e B. arachnoides apresentam a sequência de aminoácidos LLPAT e as espécies C. jacchus, A. caraya e A. clamitans apresentaram a sequência de aminoácidos LLPGT. Foi descoberto... (AU)

Color vision in vertebrates requires the presence of at least two different classes of cones in the retina, and a neural substrate capable to compare the activation of the different photoreceptors, which ultimately leads to color perception. Old World Monkeys (OWM), including humans, have trichromatic color vision, whereas New World Monkeys (NWM) have visual pigment genes polymorphism and among primates, are the only group with dichromatic or trichromatic individuals in the same species. This polymorphism in NWM occurs due to the variability of genes that express the opsins responsible for absorbing medium or long wavelengths. The genetic studies of color vision are fundamental for the comprehension of color perception in these animals and it could help to understand the color vision evolution in Primates. The aim of this work is to characterize the visual pigment diversity (LWS/MWS and SWS1) in NWM species by genetic analysis and estimate the opsin spectral absorption peak, based on the amino acid sequence. Blood, feces and hair were collected from six primate genres from different regions of Brazil (Pará, Rio de Janeiro, Rio Grande do Norte and São Paulo): Cebus apella, Callithrix jacchus, Alouatta clamitans, Alouatta caraya, Lagothrix lagothricha, Ateles belzebuth and Brachyteles arachnoides. The amino acid sequences found in important positions of the SWS1 gene (52, 86, 93, 114 and 118) were different among some species. In C. apella, L. lagotricha, A. belzebuth and B. arachnoides was found the amino acid sequence LLPAT. In C. jacchus, A. caraya and A. clamitans the amino acid sequence was LLPGT. It was observed in previous studies... (AU)

Diagnóstico paleoparasitológico de protozoários do gêneroLeishmania Ross, 1903 (Kinetoplastida, Trypanosomatidae)em material arqueológico da América do Sul / Parasitological diagnosis paleo protozoa of the genus Leishmania Ross, 1903 (Kinetoplastida, Trypanosomatidae) in archaeological material from South America

Espécies do gênero Leishmania (Kinetoplastida, Trypanosomatidae) são agentescausadores de leishmanioses, que representam um complexo de doenças com variado espectroclínico e diversidade epidemiológica que, em alguns países, constituem-se em grave problema de saúde pública. A origem e evolução das leishmanioses têm estado em debate em seus aspectos clínicos e parasitológicos. Com a introdução da paleoparasitologia baseada na aplicação de diferentes técnicas, tornou-se possível a recuperação de vestígios do parasito,assim como o diagnóstico de infecções em humanos e em outros hospedeiros no passado. Os objetivos desta pesquisa foram diagnosticar parasitos do gênero Leishmania spp., em materiais arqueológicos da América do Sul por meio de técnicas moleculares e imunológicas. Estes são os primeiros registros de recuperação de DNA de Leishmania sp. em material arqueológico do Brasil, assim como também o primeiro registro deL. tarentolae em material antigo. Dois pares de primers que amplificam outras regiões de L. tarentolae foram desenhados para o estudo no intuito de averiguar se outros trechos de DNA desta espécie também teriam se preservado no material, tendo os mesmos não amplificado.Duas explicações são possíveis: devido a natureza fragmentada do DNA antigo o mesmo não se conservou de maneira homogenia no material, ou pode se tratar de um infectron, o que também é um dado relevante pois é uma assinatura da relação estabelecida entre parasito e hospedeiro...

Species of the genus Leishmania (Kinetoplastida, Trypanosomatidae) are causativeagents of leishmaniasis, which represents a complex disease with varied clinical spectrum and epidemiological diversity that, in some countries, constitute a serious public health problem. The origin and evolution of leishmaniasis has been under discussion in clinical and parasitological aspects. By the introduction of paleoparasitology based on the application of different techniques, as well as the diagnosis of infections in humans and other hosts in the past. Theaims of this research were: diagnosis by molecular PCR technique parasites of the genus Leishmaniain archaeological materials of South America, with the comparison of the sequences obtained from the GenBank for both recent and archaeological material, diagnosis through serological techniques: rapid test DPP and Western Blot, anti-Leishmania antibodies in the samples submitted to PCR, with subsequent comparison of these serological techniques with the previous lyused molecular technique and thus contribute to the knowledge of paleoparasitology of leishmaniasis, giving contributing to studies on the origin and evolution of Leishmania genus...

A review of the New World Atteva Walker moths (Yponomeutidae, Attevinae) / Resenha das mariposas do gênero Atteva Walker do Novo Mundo (Yponomeutidae, Attevinae)

The New World species of Atteva Walker are reviewed and illustrated in colour. One name: A. pustulella (Fabricius), nom. rev. and three species: A. aurea (Fitch), sp. rev., A. floridana (Neumoegen), sp. rev. and A. gemmata (Grote), sp. rev. are reinstated; five names are synonymised under A. aurea: Poeciloptera compta Clemens, syn. n., A. edithella Busck, syn. n., A. exquisita Busck, syn. n., A. ergatica Walsingham, syn. n. and A. microsticta Walsingham, syn. n.; four new species are described: A. rawlinsi sp. n., from the Dominican Republic, A. sidereoides sp. n., from Jamaica, A. entermedia sp. n., from Antigua, and A. zebrina sp. n., from Brazil; lectotypes for A. floridana and A. glaucopidella (Guenée) (=fulviguttata) are also designated.

As species de Atteva Walker são revistas e ilustradas em cores. Um nome: A. pustulella (Fabricius), nom. rev. e três espécies: A. aurea (Fitch), sp. rev., A. floridana (Neumoegen), sp. rev. and A. gemmata (Grote), sp. rev. são restabelecidos; cinco nomes são considerados sinônimos recentes de A.aurea: Poeciloptera compta Clemens, syn. n., A. edithella Busck, syn. n., A. exquisita Busck, syn. n., A. ergatica Walsingham, syn. n. e A. microsticta Walsingham, syn. n.; quatro espécies novas são descritas: A. rawlinsi sp. n., da República Dominica, A. sidereoides sp. n., da Jamaica, A. entermedia sp. n., de Antigua, e A. zebrina sp. n., do Brazil; são designados lectótipos para A. floridana e A. glaucopidella (Guenée) (=fulviguttata).

Catalogue of American Nycteribiidae (Diptera, Hippoboscoidea)

A catalogue of the family Nycteribiidae (Diptera, Hippoboscoidea) of the New World is presented. Two genera and 52 species are listed in alphabetical order. Each genus account lists synonymies and type species, and each species account lists type locality and host, disposition of type material, geographic and host distribution, and a detailed bibliography.

Um catálago da família Nycteribiidae (Diptera, Hippoboscoidea) no Novo Mundo é apresentado. Dois gêneros e 52 espécies são listados em ordem alfabética. São disponibilizados abaixo de cada gênero, sinônimos e espécies-tipo e sob cada espécie, informações sobre localidade-tipo, hospedeiro-tipo, acrônimos da instituição onde o material-tipo está depositado, distribuição geográfica, hospedeiros e detalhada referências bibliográficas.